Practicas a realizar en operar equipo y material de laboratorio
Etapa preanalitica.
· Practica #1Elaborar medio de cultivo.·
Practica #2Esterilización de medios de cultivo.·
Practica #3Siembra en estría de medios de cultivo.·
Practica #4Observación del desarrollo de microorganismos, lecturas de colonias.·
Practica #5Frotis para tinción.
·
Practica #6Tinción de Gram.· Practica
#7Observación microscópica en objetivo 100x con aceite de inmersión.·
Practica #8 Prueba de reacciones febriles para prueba de aglutinación en serologia.·
Practica #9Prueba de aglutinación en sangre utilizando tubo con anticoagulante.
jueves, 25 de junio de 2009
practica Nº 2
Tecnica de esterilizacion
Técnica de esterilizaciónSe hace hincapié que los alumnos deben de conocer adecuadamente este tipo de tecnica ya que al realizarla tiene mucho riesgo que pude ocacionar un accidente. Se debe tener lista desde el principio de la practica para ahorrar y agilizar tiempo. Debemos tenerla lista higiénicamente con su agua destilada hasta el ras de las parrillas y seguir las indicaciones de la tecnica de esterilización.
Técnica de esterilizaciónSe hace hincapié que los alumnos deben de conocer adecuadamente este tipo de tecnica ya que al realizarla tiene mucho riesgo que pude ocacionar un accidente. Se debe tener lista desde el principio de la practica para ahorrar y agilizar tiempo. Debemos tenerla lista higiénicamente con su agua destilada hasta el ras de las parrillas y seguir las indicaciones de la tecnica de esterilización.
autoClave
AUTOCLAVE
(Sistema de Esterilización) El autoclave es una herramienta que se ocupa para esterilizar materiales de laboratorio. Reactivos o medios de cultivo y algunos otros elementos que se requieran esterilizar.La estructura de la autoclave es a base de acero inoxidable y consta de los siguientes elementos:
1.-Tapa de acero inoxidable con válvula de escape en la parte superior de la tapa y un manómetro con forma de reloj da un registro en libras y en grados centígrados y en la parte interna o inferior pende de la tapa una manera corrugada que nos da la facilidad de poder salir el vapor que se encuentra en el interior del autoclave.
2.- La olla en su interior contiene un contenedor de aluminio con 2 asas y una pequeña parrilla donde se deposita los productos que se van a esterilizar en su parte interna tiene como sostén una parrilla de alambre que nos da la facilidad de contener la olla o el contenedor de aluminio y que no rose con la resistencia que da la energía al equipo en el fondo se encuentra una resistencia que opera por medio de corriente alterna ósea AMPERES la parte exterior de la autoclave se encuentra un dispositivo de encendido una perilla de baja x alta temperatura y un foco de advertencia luminoso color rojo y además cuenta con su cable conector de energía alterna con 110 voltios. En la parte superior de la autoclave se encuentra unos grilletes a base de rosca, y que son la medida de seguridad al cerrar la tapa de la autoclave y que deben de manejarse en forma de cruz. Se va a operar en forma de cruz asegurándolo de tal manera que podamos evitar un accidente.La autoclave se debe de manejar en su interior con agua destilada la cual se debe de medir para registrar el volumen del líquido utilizado, el que debe ir al ras de la parrilla.
3.- El proceso de esterilización de este equipo se lleva en Angulo plano (tiempo), se ocupa sistema métrico decimal, volumen y masa. Además se utiliza sistema anglosajón, sistema de temperaturas como °C, K y °F, este equipo alcanza una presión de 15 Libras y una temperatura de 120 °C.
4.-El proceso de esterilización debe de ser por tiempos, inmediatamente después de entrar a laboratorio se deben de organizar y preparar el rol de operación y equipo de esterilización por calor húmedo. Iniciando la clase de laboratorio en práctica se debe de encender, habilitar con agua destilada, donde se ocupan 30 minutos de tiempo hasta que eleve su temperatura al punto de ebullición.
5.- Purgar el equipo: Una vez que el equipo de autoclave está cerrado con seguridad se deja elevar la presión y que esta llegue hasta 5 Libras y posterior mente se empezara a dejar salir presión a base de vapor manipulando con un guante de seguridad para la alta temperatura. Una vez purgado el equipo se deja subir la aguja del nanómetro hasta 15 libras y se registra el tiempo de la elevación de la temperatura. Ya estando las 15 Libras se empieza a contar el tiempo de 30 minutos que nos da la esterilización de los productos.La presión de 15 Libras que nos da 120°C si se descuida en su manejo puede ocasionar accidentes severos.Equipo de esterilización de calor seco:El equipo de esterilización de calor seco es para realizar trabajos inmediatos de cristalería, metales y todo tipo de esterilización pero ordenada, para no tener errores en la actividad. Se opera por corriente alterna (amperes) 110 voltios y alcanza temperaturas de hasta 510 °C
(Sistema de Esterilización) El autoclave es una herramienta que se ocupa para esterilizar materiales de laboratorio. Reactivos o medios de cultivo y algunos otros elementos que se requieran esterilizar.La estructura de la autoclave es a base de acero inoxidable y consta de los siguientes elementos:
1.-Tapa de acero inoxidable con válvula de escape en la parte superior de la tapa y un manómetro con forma de reloj da un registro en libras y en grados centígrados y en la parte interna o inferior pende de la tapa una manera corrugada que nos da la facilidad de poder salir el vapor que se encuentra en el interior del autoclave.
2.- La olla en su interior contiene un contenedor de aluminio con 2 asas y una pequeña parrilla donde se deposita los productos que se van a esterilizar en su parte interna tiene como sostén una parrilla de alambre que nos da la facilidad de contener la olla o el contenedor de aluminio y que no rose con la resistencia que da la energía al equipo en el fondo se encuentra una resistencia que opera por medio de corriente alterna ósea AMPERES la parte exterior de la autoclave se encuentra un dispositivo de encendido una perilla de baja x alta temperatura y un foco de advertencia luminoso color rojo y además cuenta con su cable conector de energía alterna con 110 voltios. En la parte superior de la autoclave se encuentra unos grilletes a base de rosca, y que son la medida de seguridad al cerrar la tapa de la autoclave y que deben de manejarse en forma de cruz. Se va a operar en forma de cruz asegurándolo de tal manera que podamos evitar un accidente.La autoclave se debe de manejar en su interior con agua destilada la cual se debe de medir para registrar el volumen del líquido utilizado, el que debe ir al ras de la parrilla.
3.- El proceso de esterilización de este equipo se lleva en Angulo plano (tiempo), se ocupa sistema métrico decimal, volumen y masa. Además se utiliza sistema anglosajón, sistema de temperaturas como °C, K y °F, este equipo alcanza una presión de 15 Libras y una temperatura de 120 °C.
4.-El proceso de esterilización debe de ser por tiempos, inmediatamente después de entrar a laboratorio se deben de organizar y preparar el rol de operación y equipo de esterilización por calor húmedo. Iniciando la clase de laboratorio en práctica se debe de encender, habilitar con agua destilada, donde se ocupan 30 minutos de tiempo hasta que eleve su temperatura al punto de ebullición.
5.- Purgar el equipo: Una vez que el equipo de autoclave está cerrado con seguridad se deja elevar la presión y que esta llegue hasta 5 Libras y posterior mente se empezara a dejar salir presión a base de vapor manipulando con un guante de seguridad para la alta temperatura. Una vez purgado el equipo se deja subir la aguja del nanómetro hasta 15 libras y se registra el tiempo de la elevación de la temperatura. Ya estando las 15 Libras se empieza a contar el tiempo de 30 minutos que nos da la esterilización de los productos.La presión de 15 Libras que nos da 120°C si se descuida en su manejo puede ocasionar accidentes severos.Equipo de esterilización de calor seco:El equipo de esterilización de calor seco es para realizar trabajos inmediatos de cristalería, metales y todo tipo de esterilización pero ordenada, para no tener errores en la actividad. Se opera por corriente alterna (amperes) 110 voltios y alcanza temperaturas de hasta 510 °C
domingo, 14 de junio de 2009
practica nº6
Tincion de gram
Materiales
Caja de petri
Portaobjetos con frotis
Algodón seco Papel secante
Mecheros de bunsen
Aceite de inmersion
Microscopio
Desarrollo
Realizamos el proceso de tincion utilizando la tincion de gram. que anteriormente ya investigamos para aplicar la tecnica correspondiente en la tincion ( 9 pasos con esta tecnica) la que se basa en el tiempo.Una vez teñida la lamina de cristal verificamos que no se queme con la tintura por lo que nos sirve el frotis y como resultado debemos elaborar otro frotis.Si la laminilla en su termino esta bien teñida acudimos a aplicamos una gota de aceite de inmersion lo montamos en la platina del microscopio lo aseguramos con las pinzas de la platina una vez asegurada realizamos el enfoque en 100X para que nuestra observación microscopica de resultado de poder visualizar las bacterias de formas esfericas y de forma de baston ambas se pueden encontrar en una sola pieza 2, 3, 4 piezas en cadenas largas y agrupadas hasta el tercer plano a estas esferas se les denomina cocos.
Materiales
Caja de petri
Portaobjetos con frotis
Algodón seco Papel secante
Mecheros de bunsen
Aceite de inmersion
Microscopio
Desarrollo
Realizamos el proceso de tincion utilizando la tincion de gram. que anteriormente ya investigamos para aplicar la tecnica correspondiente en la tincion ( 9 pasos con esta tecnica) la que se basa en el tiempo.Una vez teñida la lamina de cristal verificamos que no se queme con la tintura por lo que nos sirve el frotis y como resultado debemos elaborar otro frotis.Si la laminilla en su termino esta bien teñida acudimos a aplicamos una gota de aceite de inmersion lo montamos en la platina del microscopio lo aseguramos con las pinzas de la platina una vez asegurada realizamos el enfoque en 100X para que nuestra observación microscopica de resultado de poder visualizar las bacterias de formas esfericas y de forma de baston ambas se pueden encontrar en una sola pieza 2, 3, 4 piezas en cadenas largas y agrupadas hasta el tercer plano a estas esferas se les denomina cocos.
practica nº5
Elaborar frotis para tincion
Materiales
Cajas petri con medio de cultivo
Asa bacteriologica
Vaso de precipitados con agua destilada (25 ml.)
Mecheros de bunsenPapel secante
Desarrollo
Se toma un portaobjetos limpio para poder realizar en su superficie un frotis fresco con el material de la caja petri “bacteriologica”
Con el asa bacteriologica se va a realizar un barrido en el porta en sus parte central, esterilizando primero el asa bacteriologica en la flama del mechero al rojo vivo,
se retira, se introduce el vaso de precipitado se toma una gota de agua con el asa se introduce al a caja petri sobre las colonias desarrolladas se toma una pequeña muestra y se deposita en el portaobjetos dandole pequeños movimientos de izquierda a derecha para estender el producto obtenido.
Si el frotis se encuentra grueso se vuelve a esterilizar el asa bacteriologica se vuelve a tomar una gota de agua, se deposita en el porta sobre el producto anteriormente depositado y se realiza nuevamente la misma maniobra y asi sucesivamente hasta que quede finalmente delgado.
Una vez terminado el proceso de barrido realizamos una maniobra sobre la flama del mechero con el mismo porta sin dejarlo fijamente en la flama a esto lo denominamos fijación de frotis por calor seco a fuego directo.Una vez fijado el frotis queda listo para el proceso de tincion de gram
Materiales
Cajas petri con medio de cultivo
Asa bacteriologica
Vaso de precipitados con agua destilada (25 ml.)
Mecheros de bunsenPapel secante
Desarrollo
Se toma un portaobjetos limpio para poder realizar en su superficie un frotis fresco con el material de la caja petri “bacteriologica”
Con el asa bacteriologica se va a realizar un barrido en el porta en sus parte central, esterilizando primero el asa bacteriologica en la flama del mechero al rojo vivo,
se retira, se introduce el vaso de precipitado se toma una gota de agua con el asa se introduce al a caja petri sobre las colonias desarrolladas se toma una pequeña muestra y se deposita en el portaobjetos dandole pequeños movimientos de izquierda a derecha para estender el producto obtenido.
Si el frotis se encuentra grueso se vuelve a esterilizar el asa bacteriologica se vuelve a tomar una gota de agua, se deposita en el porta sobre el producto anteriormente depositado y se realiza nuevamente la misma maniobra y asi sucesivamente hasta que quede finalmente delgado.
Una vez terminado el proceso de barrido realizamos una maniobra sobre la flama del mechero con el mismo porta sin dejarlo fijamente en la flama a esto lo denominamos fijación de frotis por calor seco a fuego directo.Una vez fijado el frotis queda listo para el proceso de tincion de gram
practica nº 4
Observacion del desarrollo de microrganismos en medios de cultivo , lectura de colonias.
Materiales
Asa bacteriologica
Mecheros de bunsen
Vaso de precipitados
Pie de rey o vernier
Torundas de algodón secas y con alcohol
Desarrollo
Las cajas de petri ya sembradas son depositadas en el campo de esterilización que se realiza con los dos mecheros hacia la parte media de la mesa.Una vez teniendo el campo,
de esterilización se observan los crecimientos de lñas cajas petri ; se registra,
lo observado, se abre la caja petri,
se registra el olor que despide lo que crecio,
el color que presenta 7y se registra con graficos, dibujos o fotografias
Materiales
Asa bacteriologica
Mecheros de bunsen
Vaso de precipitados
Pie de rey o vernier
Torundas de algodón secas y con alcohol
Desarrollo
Las cajas de petri ya sembradas son depositadas en el campo de esterilización que se realiza con los dos mecheros hacia la parte media de la mesa.Una vez teniendo el campo,
de esterilización se observan los crecimientos de lñas cajas petri ; se registra,
lo observado, se abre la caja petri,
se registra el olor que despide lo que crecio,
el color que presenta 7y se registra con graficos, dibujos o fotografias
practica nº 3
Siembras en caja petri en forma de estrias
Materiales
Cajas petri con medio de cultivo ya elaboradoMuestras de desechos como saliva,
espacios interdentales,
raspado de piel, orina
, agua fresca
, sangre.Asa
bacteriologicaMechero de bunsen (2)
Vaso de precipitado (25 ml. de agua )
Papel para vestir mesaPapel secante
Torundas de algodónMaskingtape
desarrollo
Se realiza la toma de una muestra de desechos para sembrarla en forma de estria en caja petri de la siguiente manera.Con el asa bacteriologica tomamos una pequeña muestra del desecho y sembramos de forma estriada en la caja petri
.2.- El asa bacteriologica se pasa por la flama del mechero para esterilizar y volver a realizar el mismo proceso con otra muestra de desechos.
3.- Una vez sembradas las cajas petri se cierran, se etiquetan aplicando los datos de la muestra y el tipo de estria, nombre de la estria sembrada.
4.- Es importante realizar las siembra en caja petri con barilla de cristal a la cual le damos el nombre de SIEMBRA POR DISPERSION.
5.- Una vez etiquetadas las cajas se entregan al encargado (a) del laboratorio para que se les de entrada al proceso de incubación en la estufa para incubar a 37ºC durante 24, 48, 72 horas
viernes, 5 de junio de 2009
PRACTICA Nº 8 AGLUTACION MATERIALES
Práctica 8
Aglutinación
Materiales
1.-Lámina de cristal para reacciones febriles
2.-Tubo de ensaye con tapón rojo estéril
3.-Palillos de madera 2 o 3 por cada uno
4.-Torundas de algodón
5.- Centrifuga
6.- Microscopio
7.-Pipeta Pasteur con lóbulo
8.- Papel secante
9.- Papel para mesa de laboratorio
10.- Torniquete
11.-Gradillas
Reactivos
Febriclin
HO AB Bruc. Proteus 0x19
º º º º
“Paciente” “sangre fresca”
Hoja de solicitud de examen
Solicitud para examen de laboratorio
Indicaciones del laboratorio para el paciente
Folio del registro
“Inmunología” (portada del libro) con 3 bacterias:
Salmonella, Brucella y Proteus
Analítica
1.- Técnica de extracción de sangre
(Venopunción)
2.- separación del paquete sanguíneo y plasma
3.-Punteo de plasma en placa de cristal
4.-Mezclar plasma con reactivo de Febriclin para observar la reacción de aglutinación
5.-Observar macroscópicamente la laminilla a tras luz
6.-observar microscópicamente el proceso de aglutinación en objetivo 10x y 40x
7.-Reportamos en hoja de laboratorio:
Nombre del laboratorio, dirección, datos del paciente: nombre, edad, peso
Para Dr.
Tífico H= +- (positivo o negativo)
Tífico O= +-
Paratífico A=+-
B
Brucella abortus= +-
Proteus 0x19 =+-
Aglutinación
Materiales
1.-Lámina de cristal para reacciones febriles
2.-Tubo de ensaye con tapón rojo estéril
3.-Palillos de madera 2 o 3 por cada uno
4.-Torundas de algodón
5.- Centrifuga
6.- Microscopio
7.-Pipeta Pasteur con lóbulo
8.- Papel secante
9.- Papel para mesa de laboratorio
10.- Torniquete
11.-Gradillas
Reactivos
Febriclin
HO AB Bruc. Proteus 0x19
º º º º
“Paciente” “sangre fresca”
Hoja de solicitud de examen
Solicitud para examen de laboratorio
Indicaciones del laboratorio para el paciente
Folio del registro
“Inmunología” (portada del libro) con 3 bacterias:
Salmonella, Brucella y Proteus
Analítica
1.- Técnica de extracción de sangre
(Venopunción)
2.- separación del paquete sanguíneo y plasma
3.-Punteo de plasma en placa de cristal
4.-Mezclar plasma con reactivo de Febriclin para observar la reacción de aglutinación
5.-Observar macroscópicamente la laminilla a tras luz
6.-observar microscópicamente el proceso de aglutinación en objetivo 10x y 40x
7.-Reportamos en hoja de laboratorio:
Nombre del laboratorio, dirección, datos del paciente: nombre, edad, peso
Para Dr.
Tífico H= +- (positivo o negativo)
Tífico O= +-
Paratífico A=+-
B
Brucella abortus= +-
Proteus 0x19 =+-
PRACTICA Nº 9 PREANALITICA
Pre analítica
Materiales:
1.-Tubo de ensaye con tapón morado
2.-Placa de porcelana excavada
3.-Wiltrobe
4.-Vasal
5.-Centrifuga
6.-Pipeta Pasteur y lóbulo
7.-Palillos de madera
8.- Torundas de algodón alcoholizadas
9.-microcentrifuga
10.-papel secante y para mesa de laboratorio
11.- Gradillas
Reactivos:
1.- Tipificadores A, b, d
Tipo sanguíneo
Prueba de aglutinación en sangre (objetivo)
Materiales:
1.-Tubo de ensaye con tapón morado
2.-Placa de porcelana excavada
3.-Wiltrobe
4.-Vasal
5.-Centrifuga
6.-Pipeta Pasteur y lóbulo
7.-Palillos de madera
8.- Torundas de algodón alcoholizadas
9.-microcentrifuga
10.-papel secante y para mesa de laboratorio
11.- Gradillas
Reactivos:
1.- Tipificadores A, b, d
Tipo sanguíneo
Prueba de aglutinación en sangre (objetivo)
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